Process for producing a neuronal host cell in vitro comprising regulatory sequences of the .beta.2-subunit of the neuronal nicotinic acetylcholine receptor

   
   

Several genes encoding subunits of the neuronal nicotinic acetylcholine receptors have been cloned and regulatory elements involved in the transcription of the .alpha.:2 and .alpha.:7-subunit genes have been described. Yet, the detailed mechanisms governing the neuron-specific transcription and the spatio-temporal expression pattern of these genes remain largely uninvestigated. The .beta.2-subunit is the most widely expressed neuronal nicotinic receptors subunit in the nervous system. We have studied the structural and regulatory properties of the 5' sequence of this gene. A fragment of 1163 bp of upstream sequence is sufficient to drive the cell-specific transcription of a reporter gene in both transient transfection assays and in transgenic mice. Deletion analysis and sit-directed mutagenesis of this promoter reveal two negative and one positive element. The positively acting sequence includes one functional E-box. One of the repressor elements is located in the transcribed region and is the NRSE/RE1 sequence already described in promoters of neuronal genes.

Parecchi geni che mettono le unità secondarie in codice dei ricevitori nicotinici di un neurone dell'acetilcolina sono stati clonati e gli elementi regolatori addetti alla trascrizione dei geni dell'alpha.:7-unità secondaria e del alpha.:2 sono stati descritti. Tuttavia, i meccanismi dettagliati che governano la trascrizione di neuron-specifico ed il modello spatio-temporale di espressione di questi geni rimangono in gran parte uninvestigated. L'beta.2-unità secondaria è l'unità secondaria nicotinica di un neurone il più ampiamente espressa dei ricevitori nel sistema nervoso. Abbiamo studiato le proprietà strutturali e regolarici della sequenza 5'di questo gene. Un frammento del punto di ebollizione 1163 della sequenza verso l'alto è sufficiente per guidare la trascrizione di cell-specifico di un gene del reporter in entrambe le analisi transitorie di transfection ed in mouse transgenic. L'analisi di omissione e la mutagenesi sed-diretta di questo promotore rivelano due elemento negativi ed un positivi. La sequenza positivamente agente include una E-scatola funzionale. Uno degli elementi del repressor è posizionato nella regione trascritta ed è la sequenza NRSE/RE1 già descritta in promotori dei geni di un neurone.

 
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< Expression systems for functional nucleic acid expression

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> Method for culturing agaricus edible fungus

> RuvB orthologues and uses thereof

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