This invention provides methods of obtaining novel polynucleotides and
encoded polypeptides by use of non-stochastic methods of directed
evolution (DirectEvolution.TM.). These methods include non-stochastic
polynucleotide site-saturation mutagenesis (Gene Site Saturation
Mutagenesis.TM.) and non-stochastic polynucleotide reassembly
(GeneReassembly.TM.). Through use of the claimed methods, genetic
vaccines, enzymes, and other desirable molecules can be evolved towards
desirable properties. For example, vaccine vectors can be obtained that
exhibit increased efficacy for use as genetic vaccines. Vectors obtained
by using the methods can have, for example, enhanced antigen expression,
increased uptake into a cell, increased stability in a cell, ability to
tailor an immune response, and the like. This invention provides methods
of obtaining novel enzymes that have optimized physical &/or biological
properties. Furthermore, this invention provides methods of obtaining a
variety of novel biologically active molecules, in the fields of
antibiotics, pharmacotherapeutics, and transgenic traits.
Этот вымысел обеспечивает методы получать polynucleotides романа и зашифрованные полипептиды by use of нон-stoxasticeskie методы сразу развития (DirectEvolution.TM.). Эти методы вклюают нон-stoxasticeski1 мутагенез мест-saturaqii polynucleotide (сатурацию Mutagenesis.TM места гена.) и нон-stoxasticeska4 разборка polynucleotide (GeneReassembly.TM.). Через пользу востребованных методов, генетических вакцин, энзимов, и других желательных молекул можно эволюционировать к желательным свойствам. Например, вакционные векторы можно получить которые exhibit увеличенный efficacy для пользы как генетические вакцины. Векторы полученные путем использование методов могут, например, увеличить выражение антигена, увеличенное понимание в клетку, увеличенную стабилность в клетке, способность портняжничать иммунную реакцию, и подобие. Этот вымысел обеспечивает методы получать энзимы романа оптимизировали физические свойства &/or биологические. Furthermore, этот вымысел обеспечивает методы получать разнообразие молекул романа биологически активно, в полях антибиотиков, pharmacotherapeutics, и transgenic traits.