In accordance with the present invention, there have been identified
extracts from a tropical plant that initiate paclitaxel-like microtubule
bundling. Bioassay-directed purification yields the steroid taccalonolide
A. Taccalonolide, like paclitaxel, initiates the formation of abnormal
interphaes and mitotic microtubules. Cells treated with taccalonolide
exhibit thick bundles of microtubules that appear to nucleate independent
of the microtubule organizing center. Abnormal mitotic spindles consisting
of multi-polar spindles are initiated by taccalonolide and resemble
abnormal mitotic spindles found in the presence of paclitaxel. Like
paclitaxel, taccalonolide causes the breakdown of the nucleus into
micronuclei. Taccalonolide causes G2/M arrest, Bc1-2 phosphorylation and
initiates an apoptotic cascade that includes the activation of caspase 3.
Taccalonolide is an effective inhibitor of proliferation against both
SK-OV-3 and MDA-MB-435 cell with IC.sub.50 values of 2.3 .mu.M and 2.1
.mu.M respectively. In contrast to paclitaxel, taccalonolide is effective
against the multidrug resistant SKVLB-1 cellline and thus appears to be a
poor substrate for P-glycoprotein-mediated transport. Although
taccalonolide is almost equipotent with paclitaxel in its effects on
cellular microtubules, it is much less potent than paclitaxel in its
ability to initiate the polymerization of purified tubulin and microtubule
protein. Taccalonolide A is the first microtubule stabilizing agent to be
discovered from a plant since identification of the mechanism of action of
paclitaxel and it is the first natural product steroid identified to have
these cellular effects.
Selon la présente invention, il y a eu des extraits identifiés d'une usine tropicale qui lancent paclitaxel-comme l'empaquetement de microtubule. la purification Essai-dirigée rapporte le taccalonolide stéroïde A. Taccalonolide, comme le paclitaxel, des initiés la formation des interphaes anormaux et des microtubules mitotic. Les cellules ont traité avec les paquets épais d'objet exposé de taccalonolide de microtubules qui apparaissent au indépendant de nucleate du centre d'organisation de microtubule. Des axes mitotic anormaux se composant des axes multipolaires sont lancés par taccalonolide et ressemblent aux axes mitotic anormaux trouvés en présence du paclitaxel. Comme le paclitaxel, le taccalonolide cause la panne du noyau dans des micronuclei. Taccalonolide cause l'arrestation de G2/M, la phosphorylation Bc1-2 et les initiés une cascade apoptotic qui inclut l'activation du caspase 3. Taccalonolide est un inhibiteur efficace de la prolifération contre la cellule SK-OV-3 et MDA-MB-435 avec les valeurs IC.sub.50 le mu.M 2.3 du mu.M et 2.1 respectivement. Contrairement au paclitaxel, le taccalonolide est efficace contre le cellline SKVLB-1 résistant de multidrug et semble ainsi être un substrat pauvre pour le transport P-glycoprotéine-négocié. Bien que le taccalonolide soit presque equipotent avec le paclitaxel dans ses effets sur les microtubules cellulaires, il est beaucoup moins efficace que le paclitaxel dans sa capacité de lancer la polymérisation de la protéine épurée de tubulin et de microtubule. Taccalonolide A est l'agent stabilisant du premier microtubule à découvrir d'une usine puisque l'identification du mécanisme de l'action du paclitaxel et d'elle est le premier stéroïde de produit naturel identifié pour avoir ces effets cellulaires.
