The present invention concerns a process by which a misfold in an Fc fusion
molecule can be prevented or corrected. In one embodiment, the process
comprises (a) preparing a pharmacologically active compound comprising an
Fc domain; (b) treating the fusion molecule with a copper (II) halide; and
(c) isolating the treated fusion molecule. The pharmacologically active
compound can be an antibody or a fusion molecule comprising a
pharmacologically active domain and an Fc domain. The preferred copper
(II) halide is CuCl.sub.2. The preferred concentration thereof is at least
about 10 mM for fusion molecules prepared in E. coli; at least about 30 mM
for fusion molecules prepared in CHO cells. The process can be employed
with any number of pharmacologically active domains. Preferred
pharmacologically active domains include OPG proteins, leptin proteins,
soluble portions of TNF receptors (e.g., wherein the fusion molecule is
etanercept), IL-1ra proteins, and TPO-mimetic peptides. The Fc domain
preferably has a human sequence, with an Fc sequence derived from IgG1
most preferred. An exemplary Fc sequence is shown in FIG. 5 hereinafter.
La présente invention concerne un processus par lequel un misfold dans une molécule de fusion de Fc peut être empêché ou corrigé. Dans une incorporation, le processus comporte (a) préparant un composé pharmacologiquement actif comportant un domaine de Fc ; (b) traitement de la molécule de fusion avec (ii) de l'halogénure de cuivre ; et (c) isolant la molécule traitée de fusion. Le composé pharmacologiquement actif peut être un anticorps ou une molécule de fusion comportant un domaine pharmacologiquement actif et un domaine de Fc. L'halogénure préféré du en cuivre (ii) est CuCl.sub.2. La concentration préférée en est au moins environ 10 millimètres pour des molécules de fusion préparées dans E. coli ; au moins environ 30 millimètres pour des molécules de fusion ont préparé en cellules de CHO. Le processus peut être utilisé avec tout nombre de domaines pharmacologiquement actifs. Les domaines pharmacologiquement actifs préférés incluent des protéines d'OPG, les protéines de leptin, parties solubles de récepteurs de TNF (par exemple, où la molécule de fusion est etanercept), de protéines d'IL-1ra, et de peptides de TPO-mimetic. Le domaine de Fc a de préférence un ordre humain, avec un ordre de Fc dérivé d'IgG1 le plus préféré. Un ordre exemplaire de Fc est montré dans fig. 5 ci-après.
