An in vitro system for identifying agents capable of inhibiting or
preventing oxidative damage is provided. The disclosed in vitro system
comprises a mouse fibroblast culture derived from a transgenic mouse
capable of expressing a reporter gene regulated by a human elastin
promoter and a chemical means for generating reactive oxygen species
within the mouse fibroblast culture. Also disclosed is a method for using
this in vitro system for identifying agents capable of inhibiting or
preventing oxidative damage. The disclosed method comprises adding a test
agent suspected of providing protection against oxidative damage to the
mouse fibroblast culture, adding a chemical means for generation of
reactive oxygen species to the culture, determining human elastin promoter
activity in the culture exposed to the test agent after a selected time
period, and comparing the determined human elastin promoter activity in
the culture exposed to the test agent to the activity of the same promoter
in a control fibroblast culture wherein a decrease in the determined human
elastin promoter activity is indicative of the test agent inhibiting or
preventing oxidative damage.
En el sistema de vitro para identificar los agentes capaces de inhibir o de prevenir daño oxidative se proporciona. El sistema in vitro divulgado abarca una cultura del fibroblast del ratón derivada de un ratón transgenic capaz de expresar un gene del reportero regulado por los medios de un promotor humano del elastin y de un producto químico para generar especie reactiva del oxígeno dentro de la cultura del fibroblast del ratón. También se divulga un método para usar este sistema in vitro para identificar los agentes capaces de inhibir o de prevenir daño oxidative. El método divulgado abarca la adición de un agente de la prueba sospechado de proporcionar la protección contra daño oxidative a la cultura del fibroblast del ratón, agregando los medios de un producto químico para la generación de la especie reactiva del oxígeno a la cultura, determinando actividad humana del promotor del elastin en la cultura expuesta al agente de la prueba después de un período seleccionado, y comparando la actividad humana resuelta del promotor del elastin en la cultura expuesta al agente de la prueba a la actividad del mismo promotor en una cultura del fibroblast del control en donde una disminución de la actividad humana resuelta del promotor del elastin es indicativa del agente de la prueba que inhibe o que previene daño oxidative.
