Isolation of lineage-restricted neuronal precursors

   
   

A self-renewing restricted stem cell population has been identified in developing (embryonic day 13.5) spinal cords that can differentiate into multiple neuronal phenotypes, but cannot differentiate into glial phenotypes. This neuronal-restricted precursor (NRP) expresses highly polysialated or embryonic neural cell adhesion molecule (E-NCAM) and is morphologically distinct from neuroepithelial stem cells (NEP cells) and spinal glial progenitors derived from embryonic day 10.5 spinal cord. NRP cells self renew over multiple passages in the presence of fibroblast growth factor (FGF) and neurotrophin 3 (NT-3) and express a characteristic subset of neuronal epitopes. When cultured in the presence of RA and the absence of FGF, NRP cells differentiate into GABAergic, glutaminergic, and cholinergic immunoreactive neurons. NRP cells can also be generated from multipotent NEP cells cultured from embryonic day 10.5 neural tubes. Clonal analysis shows that E-NCAM immunoreactive NRP cells arise from an NEP progenitor cell that generates other restricted CNS precursors. The NEP-derived E-NCAM immunoreactive cells undergo self renewal in defined medium and differentiate into multiple neuronal phenotypes in mass and clonal culture. Thus, a direct lineal relationship exists between multipotential NEP cells and more restricted neuronal precursor cells present in vivo at embryonic day 13.5 in the spinal cord.

Une population limitée par art de l'auto-portrait-renewing de cellules de tige a été identifiée en (jour embryonnaire 13.5) cordons médullaires se développants qui peuvent différencier dans des phénotypes neuronaux multiples, mais ne peut pas différencier dans des phénotypes glial. Ce précurseur neuronal-restreint (NRP) exprime fortement polysialated ou la molécule neurale embryonnaire d'adhérence de cellules (E-NCAM) et est morphologiquement distinct des cellules de tige neuroepithelial (cellules de NEP) et des ancêtres glial spinaux dérivés du cordon médullaire du jour 10.5 embryonnaires. L'art de l'auto-portrait de cellules de NRP remplacent les passages multiples finis en présence du facteur de croissance de fibroblaste (FGF) et du neurotrophin 3 (NT-3) et expriment un sous-ensemble caractéristique d'epitopes neuronaux. Une fois cultivées en présence du RA et de l'absence de FGF, les cellules de NRP différencient dans GABAergic, glutaminergic, et neurones immunoreactive cholinergiques. Des cellules de NRP peuvent également être produites des cellules multipotent de NEP cultivées des tubes neuraux du jour 10.5 embryonnaires. L'analyse clonale prouve que les cellules immunoreactive d'E-NCAM NRP résultent d'une cellule d'ancêtre de NEP qui produit d'autres précurseurs restreints de CNS. Les cellules immunoreactive Noeud-dérivées d'E-NCAM subissent le renouvellement d'art de l'auto-portrait dans le milieu défini et le différencient dans des phénotypes neuronaux multiples dans la culture de masse et clonale. Ainsi, un rapport linéal direct existe entre les cellules multipotential de NEP et les cellules neuronales plus limitées de précurseur actuelles in vivo au jour embryonnaire 13.5 dans le cordon médullaire.

 
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