Methods of synthesizing cell-free protein

   
   

One embodiment of the present invention is a diffusion continuous batch cell-free protein-synthesis method characterized simultaneously by continuously supplying substrate and energy source molecules in the supply phase to the reaction phase by the free diffusion via interface between both phases and by transferring by-products formed in the reaction phase by enhancing the efficiency of the synthesis reaction by prolonging the reaction lifetime by directly contacting a synthesis reaction mixture (reaction phase) containing a biological extract with a substrate- and energy source-supplying solution (supply phase) without using barrier such as semi-permeable membrane or ultrafiltration membrane in a general cell-free protein-synthesis reaction means. Another embodiment of the present invention is a dilution batch cell-free protein synthesis method characterized by enhancing the efficiency of the protein synthesis by prolonging the reaction lifetime by adding a diluting solution to the reaction mixture after pre-incubating the reaction mixture in a cell-free protein-synthesis reaction means using a wheat-embryo extract. Another embodiment of the present invention is a method characterized by enhancing the efficiency of the synthesis reaction simultaneously by re-supplying substrate and energy sources necessary for the protein synthesis (e.g., amino acids, ATP, GTP, creatine phosphate) to the reaction mixture using a gel filtration column and/or semipermeable membrane and by discontinuously removing by-products formed during the reaction after the synthesis reaction stops in the batch cell-free protein synthesis method.

Eine Verkörperung der anwesenden Erfindung ist eine Diffusion (Zerstäubung) ununterbrochene Reihe zellfreie Protein-Synthese Methode, die gleichzeitig gekennzeichnet wird, indem sie ununterbrochen Substrat- und Energiequellmoleküle in der Versorgungsmaterial-Phase an die Reaktion Phase durch die freie Diffusion (Zerstäubung) über Schnittstelle zwischen beiden Phasen liefert und indem sie die Nebenerscheinungen bringt, die in der Reaktion Phase gebildet werden, indem sie die Leistungsfähigkeit der Synthesereaktion erhöht, indem sie die Reaktion Lebenszeit ausdehnt, indem sie direkt mit einem Synthesereaktionsgemisch (Reaktion Phase) einen biologischen Extrakt enthalten mit einer Substrat- und der Energie Quelle-Liefernlösung (Versorgungsmaterial-Phase) ohne Sperre wie halbdurchlässige Membrane oder Ultrafiltrationmembrane eine in den allgemeinen zellfreien Protein-Synthese Reaktion Mitteln zu verwenden in Verbindung tritt. Eine andere Verkörperung der anwesenden Erfindung ist eine Verdünnungreihe zellfreie Protein-Synthesemethode, die indem sie erhöht die Leistungsfähigkeit der Proteinsynthese gekennzeichnet wird, indem sie die Reaktion Lebenszeit ausdehnt, indem sie eine verdünnende Lösung dem Reaktionsgemisch hinzufügt, nachdem sie das Reaktionsgemisch eine in den zellfreien Protein-Synthese Reaktion Mitteln mit einem Weizen-Embryo Extrakt ausgebrütet hat. Eine andere Verkörperung der anwesenden Erfindung ist eine Methode, die indem sie gleichzeitig erhöht die Leistungsfähigkeit der Synthesereaktion gekennzeichnet wird, indem sie das Substrat und Energiequellen erneut beliefert, die für die Proteinsynthese notwendig sind (z.B., Aminosäuren, Atp, GTP, Kreatinphosphat) zum Reaktionsgemisch mit einer Gelfiltrationspalte und/oder einer halbdurchlässigen Membrane und indem sie unterbrochen die Nebenerscheinungen entfernt, die während der Reaktion gebildet werden, nachdem die Synthesereaktion in der Reihe zellfreien Protein-Synthesemethode stoppt.

 
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