Disclosed is a process for transcribing RNA using a nucleotide reagent as
the promoter. Such a reagent enables any type of RNA to be transcribed
without sequence specification and without protein cofactors, by means of
an RNA polymerase that is known to be DNA-dependent such as the RNA
polymerase of the phage T7, or by means of new, mutated RNA polymerase
with the ability to synthesize a transcription product of a polynucleotide
matrix with a higher yield when the matrix is RNA than when said matrix is
DNA. This type of RNA polymerase can be obtained by effecting mutations on
a coding gene for a wild-type RNA polymerase, and then by selecting the
mutated RNA polymerase with said ability. The invention can be applied
notably to the detection, synthesis or quantification of RNA.
Se divulga un proceso para transcribir el RNA usando un reactivo del nucleotide como el promotor. Tal reactivo permite a cualquier tipo de RNA ser transcrito sin la especificación de la secuencia y sin cofactores de la proteína, por medio de una polimerasa del RNA que se sepa para ser DNA-DEPENDIENTE por ejemplo la polimerasa del RNA del T7 phage, o por medio de la polimerasa nueva, transformada del RNA con la capacidad sintetice un producto de la transcripción de una matriz del polynucleotide con una producción más alta cuando la matriz es RNA que cuando la matriz dicha es DNA. Este tipo de polimerasa del RNA puede ser obtenido efectuando mutaciones en un gene de la codificación para un salvaje-tipo polimerasa del RNA, y entonces seleccionando la polimerasa transformada del RNA con la capacidad dicha. La invención se puede aplicar notablemente a la detección, a la síntesis o a la cuantificación del RNA.
