Process and materials for the rapid detection of streptococcus pneumoniae employing purified antigen-specific antibodies

   
   

A process is disclosed for obtaining a C-polysaccharide cell wall antigen containing not more than about 10% protein from Streptococcus pneumoniae bacteria. The antigen thus obtained is conjugated to a spacer molecule, and the free end of the latter is then conjugated to a chromatographic affinity column. The column is then utilized to purify raw antibodies to S. pneumonia bacteria, thereby producing antigen-specific antibodies. A portion of such antibodies is conjugated to a labeling agent which displays a visible color change upon reaction of the antibodies with their antigenic binding partner and embedded in a first zone of an immunochromatographic assay device. Another portion of such antibodies is bound to the reaction zone of the device which has a view window. When a liquid sample, such as patient urine, cerebrospinal fluid or blood is applied to the first zone, the conjugate of antibodies and labeling agent and the sample move along a flow strip of bibulous material to the reaction zone wherein, if the sample contains S. pneumoniae or its cell wall antigen, a sandwich is formed among the labeled conjugate, the antigen and the bound antibodies and a color change is observed. The immunochromatographic assay thus performed is completed within about 15 minutes. This assay affords a basis for rapid and reliable diagnosis of various pathogenic states caused by S. pneumoniae including pneumonia, bronchitis, otitis media, sinusitis, meningitis, and secondary disease states that commonly occur when primary pneumonic infection caused by this bacterium persists undiminished over a time period of 3-5 days.

Um processo é divulgado obtendo um antígeno da parede de pilha do C-c-polysaccharide que contem a proteína não mais do que de aproximadamente 10% do streptococcus bactérias dos pneumoniae. O antígeno obtido assim conjugated a uma molécula do espaçador, e o fim livre do último conjugated então a uma coluna chromatographic da afinidade. A coluna é utilizada então para purify antibodies crus às bactérias do pneumonia do S., produzindo desse modo antibodies antígeno-específicos. Uma parcela de tais antibodies conjugated a um agente etiquetando que indique uma mudança visível da cor em cima da reação dos antibodies com seu sócio obrigatório antigenic e é encaixada em uma primeira zona de um dispositivo immunochromatographic do assay. Uma outra parcela de tais antibodies é limitada à zona da reação do dispositivo que tem uma janela da vista. Quando uma amostra líquida, tal como o urine paciente, o líquido cerebrospinal ou o sangue são aplicados à primeira zona, o conjugate dos antibodies e agente etiquetando e o movimento da amostra ao longo de uma tira do fluxo do material bibulous à zona da reação wherein, se a amostra contiver pneumoniae do S. ou seu antígeno da parede de pilha, um sanduíche está dado forma entre o conjugate etiquetado, o antígeno e os antibodies encadernados e uma mudança da cor são observados. O assay immunochromatographic executado assim é terminado dentro de aproximadamente 15 minutos. Este assay tem recursos para uma base para rápido e o diagnóstico de confiança dos vários estados pathogenic causados por pneumoniae do S. including o pneumonia, o bronchitis, os meios do otitis, o sinusitis, o meningitis, e a doença secundária indica que ocorrem geralmente quando a infecção pneumonic preliminar causada por esta bactéria persiste undiminished sobre um período de tempo de 3-5 dias.

 
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