The sensitivity of enzyme-based polarographic electrodes to oxygen
concentration can be significantly reduced or eliminated by providing an
oxygen-reservoir in intimate contact with the oxidative enzyme. This is
achieved by making a stabilized emulsion between the enzyme and a compound
in which oxygen is extremely soluble. An aqueous glucose oxidase solution
is emulsified with a perfluorocarbon liquid, and the resulting emulsion is
stabilized by chemically crosslinking the mixture to form a gel. Thin
layers of the emulsion are fabricated by spreading a layer of the liquid
emulsion before gelation occurs. Additional carrier proteins such as
albumin may be added to the enzyme prior to crosslinking to protect
enzymatic activity and enhance gel strength. Additional electron transport
compounds may be added to further reduce sensitivity to oxygen
concentration.
Η ευαισθησία των ένζυμο-βασισμένων στον πολαρογραφικών ηλεκτροδίων στη συγκέντρωση οξυγόνου μπορεί να μειωθεί σημαντικά ή να αποβληθεί με την παροχή μιας οξυγόνο-δεξαμενής σε οικεία επαφή με το οξειδωτικό ένζυμο. Αυτό επιτυγχάνεται με την παραγωγή ενός σταθεροποιημένου γαλακτώματος μεταξύ του ενζύμου και μιας ένωσης στα οποία το οξυγόνο είναι εξαιρετικά διαλυτό. Μια υδάτινη λύση οξειδάσεων γλυκόζης είναι γαλακτωματοποιημένη με ένα υγρό perfluorocarbon, και το προκύπτον γαλάκτωμα σταθεροποιείται με χημικά να διασυνδέσει το μίγμα για να διαμορφώσει ένα πήκτωμα. Τα λεπτά στρώματα του γαλακτώματος κατασκευάζονται με τη διάδοση ενός στρώματος του υγρού γαλακτώματος προτού να εμφανιστεί ο σχηματισμός πηκτώματος. Οι πρόσθετες πρωτεϊ'νες μεταφορέων όπως η λευκωματίνη μπορούν να προστεθούν στο ένζυμο πριν από τη διασύνδεση για να προστατεύσουν την ενζυματική δραστηριότητα και να ενισχύσουν τη δύναμη πηκτωμάτων. Οι πρόσθετες ενώσεις μεταφορών ηλεκτρονίων μπορούν να προστεθούν για να μειώσουν περαιτέρω την ευαισθησία στη συγκέντρωση οξυγόνου.
