Fluorescent capture assay for kinase activity employing an anti-phosphotyrosine antibody as both the capture agent and detecting agent

   
   

A method for determining the level of tyrosine kinase activity in a biological sample is disclosed. The method employs an anti-phosphotyrosine antibody as both the capture agent and the detecting agent. The detecting antibody is labeled with a fluorescent label, for instance, Cy5, Cy5.5 or Cy7 or a lanthanide ion, such as europium, as the signal generating entity. The method is particularly well suited to high throughput screening, for example, for compounds which modulate tyrosine kinase activity.

Une méthode pour déterminer le niveau de l'activité de kinase de tyrosine dans un échantillon biologique est révélée. La méthode utilise un anticorps d'anti-phosphotyrosine comme agent de capture et agent détectant. L'anticorps détectant est marqué avec une étiquette fluorescente, par exemple, Cy5, Cy5.5 ou Cy7 ou un ion de lanthanide, tel que l'europium, comme signal produisant de l'entité. La méthode est en particulier bonne convenue au criblage élevé de sortie, par exemple, pour les composés qui modulent l'activité de kinase de tyrosine.

 
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