Zinc finger proteins of the Cys.sub.2 His.sub.2 type represent a class of
malleable DNA binding proteins which may be selected to bind diverse
sequences. Typically, zinc finger proteins containing three zinc finger
domains, like the murine transcription factor Zif268 and the human
transcription factor Sp1, bind nine contiguous base pairs (bp). To create
a class of proteins which would be generally applicable to target unique
sites within complex genomes, the present invention provides a polypeptide
linker that fuses two three-finger proteins. Two six-fingered proteins
were created and demonstrated to bind 18 contiguous bp of DNA in a
sequence specific fashion. Expression of these proteins as fusions to
activation or repression domains allows transcription to be specifically
up or down modulated within cells. Polydactyl zinc finger proteins are
broadly applicable as genome-specific transcriptional switches in gene
therapy strategies and the development of novel transgenic plants and
animals. Such proteins are useful for inhibiting, activating or enhancing
gene expression from a zinc finger-nucleotide binding motif containing
promoter or other transcriptional control element, as well as a structural
gene or RNA sequence.
Les protéines de doigt de zinc du type de Cys.sub.2 His.sub.2 représentent une classe des protéines obligatoires malléables d'ADN qui peuvent être choisies pour lier des ordres divers. Typiquement, les protéines de doigt de zinc contenant trois domaines de doigt de zinc, comme le facteur murin Zif268 de transcription et le facteur humain Sp1 de transcription, lient neuf paires basses contiguës (point d'ébullition). Pour créer une classe des protéines qui seraient généralement applicables aux emplacements uniques de cible dans les génomes complexes, la présente invention fournit un éditeur de liens de polypeptide qui fond deux protéines de trois-doigt. Deux protéines six-digitées ont été créées et démontrées pour lier le point d'ébullition 18 contigu de l'ADN d'une mode de détail d'ordre. L'expression de ces protéines comme fusions aux domaines d'activation ou de répression permet à la transcription d'être spécifiquement haute ou vers le bas modulée dans des cellules. Les protéines de doigt de zinc de Polydactyl sont largement applicables comme commutateurs génome-spécifiques de transcriptional dans des stratégies de thérapie de gène et développement des usines transgéniques et des animaux de roman. De telles protéines sont utiles pour empêcher, activer ou augmenter l'expression de gène d'un motif obligatoire de doigt-nucléotide de zinc contenant l'instigateur ou tout autre élément de commande de transcriptional, aussi bien qu'un gène ou un ordre structural d'ARN.
