The invention concerns a method for purifying PrPres from a biological
sample to be used for qualitative and/or quantitative determination of the
PrPres in said sample. The method essentially consists in: (1) incubating,
during 30 seconds to 2 hours, at a temperature less than 80.degree. C.,
said biological sample with a buffer solution A comprising at least a
surfactant in an amount ranging between a quarter and four times the
weight of the biological sample and optionally a protease, to form a
suspension S1; (2) adding to said suspension S1 resulting from (1) a
buffer solution B in an amount sufficient for thinning said suspension,
which buffer solution B consists of a solvent or mixture of solvents,
which does not solubilize the PrPres and has a constant dielectric ranging
between 10 and 25; (3) centrifuging the suspension S2 resulting from step
(2); and (4) solubilizing said pellet in a buffer solution C comprising at
least a surfactant and/or at least a chaotropic agent, at a temperature
ranging between room temperature and 100.degree. C.
Η εφεύρεση αφορά μια μέθοδο για τον καθαρισμό PrPres από ένα βιολογικό δείγμα που χρησιμοποιείται για τον ποιοτικό ή/και ποσοτικό προσδιορισμό του PrPres στο εν λόγω δείγμα. Η μέθοδος συνίσταται ουσιαστικά σε: (1) επωάζοντας, κατά τη διάρκεια 30 δευτερολέπτων σε 2 ώρες, σε μια θερμοκρασία λιγότερο από 80.degree. Γ., είπε το βιολογικό δείγμα με ένα ρυθμιστικό διάλυμμα Α περιλαμβάνοντας τουλάχιστον ένα μέσο επιπολής σε ένα ποσό που κυμαίνεται μεταξύ τετάρτου και τέσσερις φορές το βάρος του βιολογικού δείγματος και προαιρετικά μιας πρωτεάσης, για να διαμορφώσει μια αναστολή s1 (2) προσθέτοντας στην εν λόγω αναστολή s1 ως αποτέλεσμα (1) ενός ρυθμιστικού διαλύμματος β σε ένα ποσό ικανοποιητικό για την εκλέπτυνση της εν λόγω αναστολής, ποιο ρυθμιστικό διάλυμμα β αποτελείται από έναν διαλύτη ή ένα μίγμα διαλυτών, οι οποίοι δεν διαλυτοποιούν το PrPres και έχουν μια σταθερή διηλεκτρική έκταση μεταξύ 10 και 25 (3) φυγοκέντρωση της αναστολής S2 ως αποτέλεσμα του βήματος (2) και (4) διαλυτοποιώντας τον εν λόγω σβόλο σε ένα ρυθμιστικό διάλυμμα γ που περιλαμβάνει τουλάχιστον ένα μέσο επιπολής ή/και τουλάχιστον έναν chaotropic πράκτορα, σε μια θερμοκρασία που κυμαίνεται μεταξύ της θερμοκρασίας δωματίου και 100.degree. γ.
