We describe a regulated antigen delivery system (RADS) that has (a) a
vector that includes (1) a gene encoding a desired gene product operably
linked to a control sequence, (2) an origin of replication conferring
vector replication using DNA polymerase III, and (3) an origin of
replication conferring vector replication using DNA polymerase I, where
the second origin of replication is operably linked to a control sequence
that is repressible by a repressor. The RADS microorganism also has a gene
encoding a repressor, operably linked to an activatible control sequence.
The RADS described provide high levels of the desired gene product after
repression of the high copy number origin of replication is lifted. The
RADS are particularly useful as live bacterial vaccines. Also described is
a delayed RADS system, in which there is a delay before the high copy
number origin is expressed after the repression is lifted. The delayed
RADS is also particularly useful for live bacterial vaccines. Also
described are several control elements useful for these systems, as well
as methods for providing immunity to a pathogen in a vertebrate immunized
with the RADS microorganisms.
Περιγράφουμε ένα ρυθμισμένο σύστημα παράδοσης αντιγόνων (RADS) που έχει (α) ένα διάνυσμα που περιλαμβάνει (1) ένα γονίδιο που κωδικοποιεί ένα επιθυμητό προϊόν γονιδίων που συνδέεται operably με μια ακολουθία ελέγχου, (2) μια προέλευση της αντένστασης παρέχοντας τη διανυσματική αντένσταση που χρησιμοποιεί την πολυμεράση ΙΙΙ DNA, και (3) μια προέλευση της αντένστασης παρέχοντας τη διανυσματική αντένσταση που χρησιμοποιεί την πολυμεράση Ι DNA, όπου η δεύτερη προέλευση της αντένστασης συνδέεται operably με μια ακολουθία ελέγχου που είναι repressible από repressor. Ο μικροοργανισμός RADS έχει επίσης ένα γονίδιο που κωδικοποιεί repressor, που συνδέεται operably με μια activatible ακολουθία ελέγχου. Τα RADS που περιγράφονται παρέχουν τα υψηλά επίπεδα του επιθυμητού προϊόντος γονιδίων αφότου ανυψώνεται η καταστολή υψηλής προέλευσης αριθμού αντιγράφων της αντένστασης. Τα RADS είναι ιδιαίτερα χρήσιμα όπως ζωντανά βακτηριακά εμβόλια. Επίσης περιγράφεται ένα καθυστερημένο σύστημα RADS, στο οποίο υπάρχει μια καθυστέρηση προτού να εκφραστεί η υψηλή προέλευση αριθμού αντιγράφων αφότου ανυψώνεται η καταστολή. Το καθυστερημένο RADS είναι επίσης ιδιαίτερα χρήσιμο για τα ζωντανά βακτηριακά εμβόλια. Επίσης περιγράφονται διάφορα στοιχεία ελέγχου χρήσιμα για αυτά τα συστήματα, καθώς επίσης και οι μέθοδοι για στην ασυλία σε ένα παθογόνο σε ένα σπονδυλωτό που ανοσοποιείται τους μικροοργανισμούς RADS.
