Novel DNA constructs and host cells comprising the same are disclosed. DNA
constructs comprise a transcription unit (e.g. operon) comprising DNA
sequences encoding for ribonucleotide reductase and thioredoxin or a
uridine kinase gene and/or a dCTP deaminase gene. In preferred embodiments
the constructs comprising DNA sequences encoding for ribonucleotide
reductase and thioredoxin further comprise DNA sequences encoding for
thymidylate synthase and/or transcription units comprising sequences
encoding for uridine kinase preferably together with dCTP deaminase. In
particularly preferred embodiments, the host cells comprise constructs
having all of the above characteristics wherein the host cell displays
repressed or no uracil DNA glycosylase activity. This may be achieved by
removal of the host cell ung gene. Use of host cells in the manufacture of
pyrimidine deoxyribonucleotides e.g. thymidine is also disclosed.
Des constructions d'ADN de roman et les cellules hôtes comportant la même chose sont révélées. Les constructions d'ADN comportent une unité de transcription (par exemple operon) comportant des ordres d'ADN codant pour la réductase de ribonucléotide et le thioredoxin ou un gène de kinase d'uridine et/ou un gène de déaminase de dCTP. Dans des modes de réalisation préférés les constructions comportant des ordres d'ADN codant pour la réductase et le thioredoxin de ribonucléotide comportent plus loin des ordres d'ADN codant pour des unités de synthase et/ou de transcription de thymidylate comportant des ordres codant pour la kinase d'uridine de préférence ainsi que le déaminase de dCTP. Dans des incorporations particulièrement préférables, les cellules hôtes comportent des constructions ayant toutes les caractéristiques ci-dessus où la cellule hôte montre réprimé ou aucune activité de glycosylase d'ADN de uracile. Ceci peut être réalisé par le déplacement du gène d'ung de cellule hôte. L'utilisation des cellules hôtes dans la fabrication de la thymidine de deoxyribonucleotides de pyrimidine par exemple est également révélée.
