A method for producing a S-nitrosylated species is provided. The method
comprises: (a) providing a deoxygenated, alkaline aqueous solution
comprising a thiol and a nitrite-bearing species; (b) acidifying the
solution by adding acid to the solution while concurrently mixing the
solution (e.g., by vigorously stirring the solution) to produce the
S-nitrosylated species; and (c) isolating the S-nitrosylated species. The
nitrite-bearing species can be, for example, an inorganic nitrite, such as
an alkali metal nitrite, or an organic nitrite, such as an alkyl nitrite
(e.g., ethyl nitrite, amyl nitrite, isobutyl nitrite or t-butyl nitrite).
The thiol is preferably a thiol-containing polysaccharide, a
thiol-containing lipoprotein, a thiol-containing amino acid or a
thiol-containing protein, and more preferably a thiol-containing
polysaccharide such as thiolated cyclodextrin. In many preferred
embodiments, the S-nitrosylated species is insoluble in the acidified
solution, precipitating upon formation. The S-nitrosylated species can be
isolated, for example, by a process in which the precipitate is removed
from the solution (e.g., by centrifugation) and the aqueous solvent
remaining in the precipitate is sublimated (e.g., by freezing the
precipitate and subjecting it to a vacuum). The isolated S-nitrosylated
product is preferably protected from heat, light, moisture and oxygen.
Un metodo per produrre una specie di S-nitrosylated è fornito. Il metodo contiene: (a) fornendo la a deoxygenated, soluzione acquosa alcalina che contiene un tiolo e una specie del nitrito-cuscinetto; (b) acidificando la soluzione aggiungendo acido alla soluzione mentre simultaneamente mescolando la soluzione (per esempio, vigoroso mescolando la soluzione) per produrre la specie di S-nitrosylated; e (c) isolando la specie di S-nitrosylated. La specie del nitrito-cuscinetto può essere, per esempio, un nitrito inorganico, quali un nitrito alcalino-metallico, o un nitrito organico, quale un nitrito alchilico (per esempio, nitrito etilico, nitrito amilico, nitrito isobutilico o nitrito t-butilico). Il tiolo è preferibilmente un polisaccaride tiolo-contenente, una lipoproteina tiolo-contenente, un amminoacido tiolo-contenente o una proteina tiolo-contenente e preferibilmente un polisaccaride tiolo-contenente quale ciclodestrina tiolata. In molti metodo di realizzazione preferito, la specie di S-nitrosylated è insolubile nella soluzione acidificata, precipitante sulla formazione. La specie di S-nitrosylated può essere isolata, per esempio, tramite un processo in cui il precipitato è rimosso dalla soluzione (per esempio, tramite centrifugazione) e dal restante solvibile acquoso nel precipitato è sublimato (per esempio, congelando il precipitato e sottoponendolo ad un vuoto). Il prodotto isolato di S-nitrosylated è protetto preferibilmente da calore, da luce, da umidità e da ossigeno.
