The present invention discloses and claims vaccines containing, as an
active ingredient, a secreted recombinantly produced dimeric form of
truncated flaviviral envelope protein. The vaccines are capable of
eliciting the production of neutralizing antibodies against flaviviruses.
The dimeric forms of truncated flaviviral envelope protein are formed 1)
by directly linking two tandem copies of 80% E in a head to tail fashion
via a flexible tether; 2) via the formation of a leucine zipper domain
through the homodimeric association of two leucine zipper helices each
fused to the carboxy terminus of an 80% E molecule; or 3) via the
formation of a non-covalently associated four-helix bundle domain formed
upon association of two helix-turn-helix moieties each attached to the
carboxy terminus of an 80% E molecule. All products are expressed as a
polyprotein including prM and the modified 80% E products are secreted
from Drosophila melanogaster Schneider 2 cells using the human tissue
plasminogen activator secretion signal sequence (tPA.sub.L). Secreted
products are generally more easily purified than those expressed
intracellularly, facilitating vaccine production. One embodiment of the
present invention is directed to a vaccine for protection of a subject
against infection by dengue virus. The vaccine contains, as active
ingredient, the dimeric form of truncated envelope protein of a dengue
virus serotype. The dimeric truncated E is secreted as a recombinantly
produced protein from eucaryotic cells. The vaccine may further contain
portions of additional dengue virus serotype dimeric E proteins similarly
produced. Another embodiment of the present invention is directed to
methods to utilize the dimeric form of truncated dengue envelope protein
for diagnosis of infection in individuals at risk for the disease. The
diagnostic contains, as active ingredient, the dimeric form of truncated
envelope protein of a dengue virus serotype. The dimeric truncated E is
secreted as a recombinantly produced protein from eucaryotic cells. The
diagnostic may further contain portions of additional dengue virus
serotype dimeric E proteins similarly produced.
Die anwesende Erfindung gibt frei und behauptet die Impfstoffe, die, als Aktivsubstanz, eine abgesonderte recombinantly produzierte zweiteilige Form des beschnittenen flaviviral Umschlagproteins enthalten. Die Impfstoffe sind zum Herausbekommen der Produktion des Neutralisierens der Antikörper gegen flaviviruses fähig. Die zweiteiligen Formen des beschnittenen flaviviral Umschlagproteins werden 1), indem man direkt zwei Tandemkopien von 80% E in einem Kopf verbindet, um Art und Weise über ein flexibles anzubinden, begrenzen gebildet; 2) über die Anordnung eines Leucinreißverschlußgebietes durch die homodimeric Verbindung von zwei Leucinreißverschlußschnecken jedes fixierte zum carboxy Terminus eines 80% E Moleküls; oder 3) über die Anordnung des non-covalently verbundenen Vierschnecke Bündels bildete sich ein Gebiet nach Verbindung von zwei Schnecke-drehen-Schnecke Hälften pro Stück, die zum carboxy Terminus eines 80% E Moleküls angebracht wurde. Alle Produkte werden als polyprotein einschließlich prM ausgedrückt und die geänderten 80% E Produkte werden Taufliege melanogaster Schneider 2 von den Zellen mit der Aktivatorabsonderung-Signalreihenfolge des menschlichen Gewebes plasminogen (tPA.sub.L) abgesondert. Abgesonderte Produkte werden im Allgemeinen leicht als die gereinigt, die intrazellulär ausgedrückt werden und erleichtern vaccine Produktion. Eine Verkörperung der anwesenden Erfindung wird auf einen Impfstoff für Schutz eines Themas gegen Infektion durch Dandyfiebervirus verwiesen. Der Impfstoff enthält, als Aktivsubstanz, die zweiteilige Form des beschnittenen Umschlagproteins eines Dandyfiebervirusserotyps. Das zweiteilige beschnittene E wird als recombinantly produziertes Protein von den eucaryotic Zellen abgesondert. Der Impfstoff kann Teile zweiteilige E ähnlich produzierte Proteine des zusätzlichen Dandyfiebervirus-Serotyps weiter enthalten. Eine andere Verkörperung der anwesenden Erfindung wird auf Methoden verwiesen, um die zweiteilige Form des beschnittenen Dandyfieberumschlagproteins für Diagnose der Infektion in den Einzelpersonen an der Gefahr für die Krankheit zu verwenden. Die Diagnose enthält, als Aktivsubstanz, die zweiteilige Form des beschnittenen Umschlagproteins eines Dandyfiebervirusserotyps. Das zweiteilige beschnittene E wird als recombinantly produziertes Protein von den eucaryotic Zellen abgesondert. Die Diagnose kann Teile zweiteilige E ähnlich produzierte Proteine des zusätzlichen Dandyfiebervirus-Serotyps weiter enthalten.
