Process for preparation of a biomarker specific for O-acetylated sialic acid useful for diagnosing, monitoring treatment outcome, and predicting relapse of lymphoblastic leukemia

   
   

The invention relates to a novel process for preparation of a biomarker specific for O-acetylated sialic acid and useful for the diagnosis, monitoring outcome of treatment and prediction of relapse of acute lymphoblastic leukemia, said process comprising the steps of (I) separating serum from the blood of patients of acute lymphoblastic leukemia; (ii) separation of low molecular weight fractions and galactose binding proteins from the serum on affinity matrix; (iii) passing the galactose free protein fraction obtained in step (ii) over another affinity matrix to capture O-acetyl sialic acid specific protein fraction; (iv) eluting specific protein fraction with a buffer at alkaline pH in the range of 8.0-11.0 followed by immediate neutralization of the fraction; (v) passing O-acetyl sialic acid specific protein obtained in step (iv) over Agarose column to get O-acetyl sialic acid specific antibody and eluting the said antibody with an appropriate buffer at acidic pH, followed by immediate neutralization of the fraction and dialyzing the neutralized protein to get purified disease specific antibody as biomarker and a method of diagnosing, monitoring outcome of treatment and prediction of relapse of acute lymphoblastic leukemia using the biomarker obtained by the novel process.

L'invenzione riguarda un procedimento del romanzo per la preparazione di un biomarker specifico per acido sialico O-acetilato ed utile per la diagnosi, controllando il risultato del trattamento e la previsione della ricaduta della leucemia linfoblastica acuta, processo ad esempio che contiene i punti (i) che separano il siero dall'anima dei pazienti della leucemia linfoblastica acuta; (ii) separazione delle frazioni a basso peso molecolare del peso e delle proteine obbligatorie del galattosio dal siero sulla tabella di affinità; (iii) passando la frazione della proteina del galattosio liberamente ottenuta al punto (ii) sopra un'altra tabella di affinità per bloccare la frazione specifica acida sialica della proteina dell'O-acetile; (iv) eluendo la frazione specifica della proteina con un amplificatore a pH alcalino nella gamma di 8.0-11.0 è seguito da neutralizzazione immediata della frazione; (v) passando ad O-acetile la proteina specifica acida sialica ottenuta al punto (iv) sopra la colonna dell'agarosi per ottenere ad O-acetile l'anticorpo specifico acido sialico ed eluendo l'anticorpo detto con un amplificatore adatto al pH siliceo, seguito da neutralizzazione immediata della frazione e di dialisi della proteina neutralizzata ottenere ha purificato la malattia anticorpo specifico come biomarker e metodo di diagnostica, controllando il risultato del trattamento e la previsione della ricaduta della leucemia linfoblastica acuta usando il biomarker ottenuto tramite il processo del romanzo.

 
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