We utilized the silkworm (Bombyx mori)/baculovirus system to produce recombinant Major Merozoite Surface Protein 1 (MSP1.sub.42) because of the low cost and potential high yield of this expression system. The MSP1.sub.42 (3D7 sequence) was cloned into the baculovirus, BmNPV with the melittin signal sequence. The recombinant virus, BmNPV-Sp42 was used to infect silkworms for the expression of MSP1.sub.42 (Sp42). One recombinant clone expressed high level of Sp42 with an estimated 0.5 mg of antigen produced within a single worm. The Sp42 was recognized by monoclonal and polyclonal antibodies specific for parasite MSP1 in direct binding and competitive binding ELISAs, suggesting that Sp42 possesses antigenic determinants similar to parasite MSP1.sub.42. Immunogenicity studies were performed in rabbits. Sp42 induced high titers of antibodies crossreactive with MSP1. Specificity analyses showed that anti-Sp42 antibodies reacted primarily against conserved determinants on MSP1-19. Our results showed that the silkworm expression system can produce recombinant MSP1.sub.42 that are antigenically and immunogenically comparable to other recombinant MSP1 antigens expressed in other eukaryotic systems. The low cost ad high level of protein expression makes it an attractive alternative for the development of a human malaria vaccine.

Χρησιμοποιήσαμε το μεταξοσκώληκα (bombyx mori)/sy'stima baculovirus για να παραγάγει ανασυνδυαζόμενη σημαντική πρωτεϊ'νη 1 επιφάνειας Merozoite (MSP1.sub.42) λόγω του χαμηλότερου κόστους και της πιθανής υψηλής παραγωγής αυτού του συστήματος έκφρασης. Το MSP1.sub.42 (ακολουθία 3D7) κλωνοποιήθηκε στο baculovirus, BmNPV με την ακολουθία σημάτων melittin. Ο ανασυνδυαζόμενος ιός, BmNPV-Sp42 χρησιμοποιήθηκε για να μολύνει τους μεταξοσκώληκες για την έκφραση MSP1.sub.42 (Sp42). Ένας ανασυνδυαζόμενος κλώνος εξέφρασε το υψηλό επίπεδο Sp42 με ένα κατ' εκτίμηση 0,5 mg του αντιγόνου που παρήχθη μέσα σε ένα ενιαίο σκουλήκι. Sp42 αναγνωρίστηκε από τα μονοκλονικά και polyclonal αντισώματα συγκεκριμένα για το παράσιτο MSP1 στην άμεση σύνδεση και η ανταγωνιστική δέσμευση ELISAs, που προτείνει ότι Sp42 κατέχει τους αντιγονικούς καθοριστικούς παράγοντες παρόμοιους με τις μελέτες ανοσοποίησης παρασίτων MSP1.sub.42. εκτελέσθηκε στα κουνέλια. Το Sp42 προκάλεσε τους υψηλούς τίτλους των αντισωμάτων crossreactive με MSP1. Οι αναλύσεις ιδιομορφίας έδειξαν ότι αντι- sp42 τα αντισώματα αντέδρασαν πρώτιστα ενάντια στους συντηρημένους καθοριστικούς παράγοντες σε MSP1-19. Τα αποτελέσματά μας έδειξαν ότι το σύστημα έκφρασης μεταξοσκωλήκων μπορεί να παραγάγει ανασυνδυαζόμενα MSP1.sub.42 που είναι antigenically και immunogenically συγκρίσιμος με άλλα ανασυνδυαζόμενα MSP1 αντιγόνα που εκφράζονται σε άλλα ευκαριωτικά συστήματα. Το υψηλό επίπεδο αγγελιών χαμηλότερου κόστους πρωτεϊνικής έκφρασης το κάνει μια ελκυστική εναλλακτική λύση για την ανάπτυξη ενός ανθρώπινου εμβολίου ελονοσίας.