A novel gene defining a novel human UDP-GlcNAc: Gal.beta.1-3 GalNAc.alpha. .beta.1,6GlcNAc-transferase, termed C2GnT3, with unique enzymatic properties is disclosed. The enzymatic activity of C2GnT3 is shown to be distinct from that of previously identified enzymes of this gene family. The invention discloses isolated DNA molecules and DNA constructs encoding C2GnT3 and derivatives thereof by way of amino acid deletion, substitution or insertion exhibiting C2GnT3 activity, as well as cloning and expression vectors including such DNA, cells transfected with the vectors, and recombinant methods for providing C2GnT3. The enzyme C2GnT3 and C2GnT3-active derivatives thereof are disclosed, in particular soluble derivatives comprising the catalytically active domain of C2GnT3. Further, the invention discloses methods of obtaining 1,6-N-acetylglucosaminyl glycosylated saccharides, glycopeptides or glycoproteins by use of an enzymically active C2GnT3 protein or fusion protein thereof or by using cells stably transfected with a vector including DNA encoding an enzymatically active C2GnT3 protein as an expression system for recombinant production of such glycopeptides or glycoproteins. Methods are disclosed for the identification of agents with the ability to inhibit or stimulate the biological activity of C2GnT3. Furthermore, methods of using C2GnT3 in the structure-based design of inhibitors or stimulators thereof are also disclosed in the invention. Also a method for the identification of DNA sequence variations in the C2GnT3 gene by isolating DNA from a patient, amplifying C2GnT3-coding exons by PCR, and detecting the presence of DNA sequence variation, are disclosed.

Ένα νέο γονίδιο που καθορίζει ένα νέο ανθρώπινο uδπ- GlcNAc: Γαλ.ψετα.1-3 GalNAc.alpha. το ψετα.1,6ΓλθΝΑθ-τρανσφερασε, που καλείται C2GnT3, με τις μοναδικές ενζυματικές ιδιότητες αποκαλύπτεται. Η ενζυματική δραστηριότητα C2GnT3 αποδεικνύεται για να είναι ευδιάκριτη από αυτήν των προηγουμένως προσδιορισμένων ενζύμων αυτής της οικογένειας γονιδίων. Η εφεύρεση αποκαλύπτει τα απομονωμένα μόρια DNA και το DNA κατασκευάζει την κωδικοποίηση C2GnT3 και παράγωγα επ' αυτού μέσω της διαγραφής, της αντικατάστασης ή της εισαγωγής αμινοξέος εκθέτοντας τη δραστηριότητα C2GnT3, καθώς επίσης και τα διανύσματα κλωνοποίησης και έκφρασης συμπεριλαμβανομένου τέτοιου DNA, κύτταρα με τα διανύσματα, και τις ανασυνδυαζόμενες μεθόδους για C2GnT3. Το ένζυμο C2GnT3 και τα θ2ΓνΤ3-ενεργά παράγωγα επ' αυτού αποκαλύπτονται, ειδικότερα διαλυτά παράγωγα περιλαμβάνοντας την καταλυτικά ενεργό περιοχή C2GnT3. περαιτέρω, η εφεύρεση αποκαλύπτουν τις μεθόδους τους glycosylated σακχαρίτες 1.6-ν- acetylglucosaminyl, glycopeptides ή glycoproteins μέσω μιας enzymically ενεργού πρωτεϊ'νης C2GnT3 ή της πρωτεϊ'νης τήξης επ' αυτού ή με τη χρησιμοποίηση των κυττάρων σταθερά με ένα διάνυσμα συμπεριλαμβανομένου του DNA που κωδικοποιεί μια enzymatically ενεργό πρωτεϊ'νη C2GnT3 ως σύστημα έκφρασης για την ανασυνδυαζόμενη παραγωγή τέτοια glycopeptides ή glycoproteins. Οι μέθοδοι αποκαλύπτονται για τον προσδιορισμό των πρακτόρων με τη δυνατότητα να εμποδίσει ή να υποκινήσει η βιολογική δραστηριότητα C2GnT3. Επιπλέον, οι μέθοδοι C2GnT3 στο δομή-βασισμένο στον σχέδιο των ανασταλτικών παραγόντων ή των διεγερτικοων επ' αυτού αποκαλύπτονται επίσης στην εφεύρεση. Επίσης μια μέθοδος για τον προσδιορισμό των παραλλαγών ακολουθίας DNA στο γονίδιο C2GnT3 με την απομόνωση του DNA από εξόνια μιας τα υπομονετικά, ενισχύοντας θ2ΓνΤ3-κωδικοποίησης από pcr, και ανίχνευση της παρουσίας παραλλαγής ακολουθίας DNA, αποκαλύπτεται.