A method is described for the direct, exponential amplification and sequencing ("DEXAS") of a DNA molecule from a complex mixture of nucleic acids, wherein truncated DNA molecules as well as DNA molecules of full length are synthesized simultaneously and exponentially between two positions on the said DNA molecule, which initially contains a DNA molecule in a thermocycling reaction, a first primer, a second primer, a reaction buffer, a thermostable DNA polymerase, a thermostable pyrophosphatase (optionally), deoxynucleotides or derivatives thereof and a dideoxynucleotide or derivatives thereof. In a preferred embodiment of the method of the invention, direct sequencing of RNA can be performed using one polymerase having a Tabor-Richardson mutation, or a functional derivative thereof, and reverse transcriptase activity. In a more preferred embodiment of the method of the invention, direct sequencing of RNA can be performed in one step, in one vessel.

Un método se describe para la amplificación directa, exponencial y ordenar ("DEXAS") de una molécula de la DNA de una mezcla compleja de ácidos nucleic, en donde las moléculas truncadas de la DNA así como las moléculas de la DNA de la longitud completa se sintetizan simultáneamente y exponencial entre dos posiciones respecto a la molécula dicha de la DNA, que contiene inicialmente una molécula de la DNA en una reacción thermocycling, una primera cartilla, una segunda cartilla, un almacenador intermediario de la reacción, una polimerasa termoestable de la DNA, un pyrophosphatase termoestable (opcionalmente), los deoxynucleotides o los derivados de eso y un dideoxynucleotide o los derivados de eso. En una encarnación preferida del método de la invención, el ordenar directo del RNA se puede realizar usando una polimerasa que tiene una mutación de Tabor-Richardson, o un derivado funcional de eso, y actividad reversa del transcriptase. En una encarnación preferida del método de la invención, el ordenar directo del RNA se puede realizar en un paso, en un recipiente.