The generation of selective inhibitors for specific protein kinases would provide new tools for analyzing signal transduction pathways and possibly new therapeutic agents. We have invented an approach to the development of selective protein kinase inhibitors based on the unexpected binding mode of 2,6,9-trisubstituted purines to the ATP binding site of human CDK2. The most potent inhibitor, purvalanol B (IC.sub.50 =6 nM), binds with a 30-fold greater affinity than the known CDK2 inhibitor, flavopiridol. The cellular effects of this class of compounds were examined and compared to those of flavopiridol by monitoring changes in mRNA expression levels for all genes in treated cells of Saccharomyces cerevisiae using high-density oligonucleotide probe arrays.

La generación de los inhibidores selectivos para los kinases de proteína específicos proporcionaría las herramientas nuevas para analizar caminos del transduction de la señal y posiblemente agentes terapéuticos nuevos. Hemos inventado un acercamiento al desarrollo de los inhibidores selectivos del kinase de proteína basados en el modo obligatorio inesperado de los purines 2,6,9-trisubstituted al sitio obligatorio del ATP de CDK2 humano. El inhibidor más potente, purvalanol B (IC.sub.50 = 6 nM), lazos con una mayor afinidad 30-fold que CDK2 el inhibidor sabido, flavopiridol. Los efectos celulares de esta clase de compuestos fueron examinados y comparados a los del flavopiridol supervisando cambios en los niveles de la expresión del mRNA para todos los genes en células tratadas de los órdenes de alta densidad cerevisiae de la punta de prueba del oligonucleotide del saccharomyces que usaban.