The present invention involves a method for preparing antibody-producing
chicken cell clones. This method comprises a series of steps including
initially immunizing a first chicken with a desired antigen. A population
of antibody-producing lymphocytes from bursa or spleen of the first
chicken is separated.
The antibody-producing lymphocyte population is then infected with
helper-free reticuloendotheliosis virus REV-T or helper-free
reticuloendotheliosis virus REV-T and CSV (preferably REV-T(CSV) and
transplanted into a second chicken, the second chicken having been
pretreated to remove normal B cells. The transplanted lymphocytes to
proliferate in the second chicken, preferably for a period of at least
about two weeks.
The lymphocytes from spleen, bursa or peripheral blood of the second
chicken are isolated and plated out, for example in microtiter plates.
Cell clones producing antibody such as IgG or IgM directed against the
desired antigen are then selected. The isolation step most preferably
involves cell culturing in the microtiter plates for a period of at least
about one week.
La presente invenzione coinvolge un metodo per la preparazione del pollo che anticorpo-producente la cellula clona. Questo metodo contiene una serie i punti compreso inizialmente l'immunizzazione del primo pollo con un antigene voluto. Una popolazione dei linfociti anticorpo-producenti da Bursa o della milza del primo pollo è separata. La popolazione anticorpo-producente del linfocita allora è infettata con il virus assistente-libero REV-T di reticuloendotheliosis o il virus assistente-libero REV-T e CSV di reticuloendotheliosis (preferibilmente REV-T(CSV) e trapiantato in un secondo pollo, il secondo pollo che è pretrattato per rimuovere le cellule di B normali. I linfociti trapiantati da proliferare nel secondo pollo, preferibilmente per un periodo almeno di circa due settimane. I linfociti dalla milza, da Bursa o da anima periferica del secondo pollo sono isolati e placcati fuori, per esempio in piastre di microtitolo. La cellula clona produrre l'anticorpo quale IgG o IgM diretto contro l'antigene voluto allora è selezionato. Il punto di isolamento idealmente coinvolge la cellula che coltiva nelle piastre di microtitolo per un periodo almeno di circa una settimana.
