The invention provides in one embodiment a composition which is a linear DNA molecule having a desired replacement sequence, and second and third sequences substantially homologous to non-identical portions of the gene and having proximal and distal ends, the proximal ends flanking the desired replacement sequence and the distal ends having a terminating nucleotide analog at each end of the molecule. Another embodiment of the invention provides methods, by blocking the 3' ends of transforming DNA with 2'3' dideoxynucleotides, to reduce the frequency of end-mediated DNA insertion. These methods introduce only one copy of the selectable gene at the target locus to achieve a precise gene disruption, reducing or eliminating undesirable and multiple insertions that occur both non-homologously and at the targeted locus.

A invenção fornece em uma incorporação uma composição que seja uma molécula linear do DNA que tem uma seqüência desejada da recolocação, e em segundo e a terceira arranja em seqüência substancialmente homologous às parcelas non-identical do gene e de ter extremidades proximal e distal, as extremidades proximal que flanqueiam a seqüência desejada da recolocação e as extremidades distal que têm um analog terminando do nucleotide em cada extremidade da molécula. Uma outra incorporação da invenção fornece métodos, obstruindo os fins 3' de transformar o DNA com ' os dideoxynucleotides o 2'3, para reduzir a freqüência da inserção extremidade-mediada do DNA. Estes métodos introduzem somente uma cópia do gene selecionável no locus do alvo para conseguir um rompimento preciso do gene, reduzindo ou eliminando as inserções indesejáveis e múltiplas que ocorrem non-homologously e no locus alvejado.