A method for producing recombinant adeno-associated virus in the absence of contaminating helper virus or wild-type virus involves culturing a mammalian host cell containing an rAd/AAV hybrid virus, an AAV rep sequence and an AAV cap sequence under the control of regulatory sequences directing expression thereof. The rAd/AAV hybrid virus contains a rAAV construct to be packaged into an AAV virion in an backbone containing the adenoviral sequences necessary to express E1a and E1b gene products and to permit replication of the hybrid virus. The method of the invention permits replication of the hybrid virus and production of rAAV virion in this host cell in the absence of a helper virus and obviates a subsequent purification step to purify rAAV from contaminating virus.

Une méthode pour produire le virus adeno-associé de recombinaison en l'absence de souiller le virus ou le sauvage-type virus d'aide implique de cultiver une cellule hôte mammifère contenant un virus hybride de rAd/AAV, un ordre de représentant d'AAV et un ordre de chapeau d'AAV sous la commande des ordres de normalisation dirigeant l'expression en. Le virus hybride de rAd/AAV contient une construction de rAAV à empaqueter dans un virion d'AAV dans une épine dorsale contenant les ordres adenoviral nécessaires des produits pour exprimer d'E1a et d'E1b gène et pour permettre la réplique du virus hybride. La méthode de l'invention permet la réplique du virus et de la production hybrides du virion de rAAV en cette cellule hôte en l'absence d'un virus d'aide et obvie à une étape suivante de purification pour épurer le rAAV de souiller le virus.

 
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