A method for producing human dendritic cells for therapeutic purposes which
allows culture-deriving dendritic cells using no cytokines, or reduced
cytokines. The method involves culturing mononuclear cells from blood or
bone marrow in a medium containing at least one agent such as a calcium
ionophore, e.g. A23187, theophylline, protaglandin E1, dibutyryl cyclic
AMP, Vitamin D3, Vitamin E, retinoic acid, or a fatty acid. The culture is
maintained for a sufficient time, typically 4-14 days, to produce a
culture enriched for dendritic cells, as evidenced by at least about 2.5%
of total cells exhibiting dendritic cell processes, or a dendritic dell
antigen such as CD80, CD86, or CD1a. Also provided is a method to produce
antigen-specific human T-cells by pulsing the dendritic cells obtained by
the method of the invention with an antigen such as a viral, tumor,
bacterial, or cell surface antigen, and then co-culturing T-cells with the
antigen-pulsed dendritic cells. Useful for treatment of viral or bacterial
infections, useful as a cancer vaccine, useful to induce tolerance of
allo- or xeno- graft.
Un método para producir las células dendríticas humanas para los propósitos terapéuticos que permite el cultura-derivar de las células dendríticas no usando ningún cytokines, o cytokines reducidos. El método implica el cultivar de las células mononucleares de la sangre o de médula en un medio que contiene por lo menos un agente tal como un ionophore del calcio, e.g. A23187, theophylline, protaglandin E1, dibutyryl amperio cíclico, vitamina D3, vitamina E, ácido retinoic, o un ácido graso. La cultura se mantiene por un suficiente tiempo, típicamente 4-14 días, para producir una cultura enriquecida para las células dendríticas, según lo evidenciado por por lo menos cerca de 2.5% de células totales que exhiben procesos dendríticos de la célula, o un antígeno dendrítico del dell tal como CD80, CD86, o CD1a. También se proporciona un método para producir las T-ce'lulas humanas anti'geno-especi'ficas pulsando las células dendríticas obtenidas por el método de la invención con un antígeno tal como un viral, un tumor, un antígeno superficial bacteriano, o de la célula, y después co-cultivar las T-ce'lulas con las células dendríticas anti'geno-pulsadas. Útil para el tratamiento de infecciones virales o bacterianas, útil como vacuna del cáncer, útil para inducir la tolerancia del injerto del allo- o del xeno-.
