Methods are provided for purifying peptides and proteins by incorporating
the peptide or protein into a diketopiperazine or competitive complexing
agent to facilitate removal one or more impurities, i.e. undesirable
components, from the peptide or protein. In a preferred embodiment, a
peptide, such as insulin, containing one or more impurities, e.g., zinc
ions, is entrapped in diketopiperazine to form a precipitate of
peptide/diketopiperazine/impurity, which is then washed with a solvent for
the impurity to be removed, which is a nonsolvent for the diketopiperazine
and a nonsolvent for the peptide. Formulations and methods also are
provided for the improved transport of active agents across biological
membranes, resulting for example in a rapid increase in blood agent
concentration. The formulations include microparticles formed of (i) the
active agent, which may be charged or neutral, and (ii) a transport
enhancer that masks the charge of the agent and/or that forms hydrogen
bonds with the target biological membrane in order to facilitate
transport. In a preferred embodiment, insulin is administered via the
pulmonary delivery of microparticles comprising fumaryl diketopiperazine
and insulin in its biologically active form. The charge on the insulin
molecule is masked by hydrogen bonding it to the diketopiperazine, thereby
enabling the insulin to pass through the target membrane. This method of
delivering insulin results in a rapid increase in blood insulin
concentration that is comparable to the increase resulting from
intravenous delivery.
Методы обеспечены для пептидов и протеинов очищать путем включать пептид или протеин в дикетопиперазин или конкурсное complexing вещество для того чтобы облегчить удаление one or more примеси, т.е. нежелательные компоненты, от пептида или протеина. В предпочитаемом воплощении, пептид, such as инсулин, содержа one or more примеси, например, оцинковывает ионы, пойман в ловушку в дикетопиперазине для того чтобы сформировать преципитат peptide/diketopiperazine/impurity, которое после этого помыто с растворителем для примеси, котор нужно извлечь, которая nonsolvent для дикетопиперазина и nonsolvent для пептида. Образования и методы также обеспечены для улучшенного перехода активно веществ через биологические мембраны, приводящ к например в быстро увеличении в концентрации вещества крови. Образования вклюают микрочастицы сформированные (i) активно вещества, которое может быть поручено или нейтрально, и (ii) улушителя перехода который маскируют обязанность вещества and/or который формирует скрепления водопода с мембраной цели биологической для того чтобы облегчить переход. В предпочитаемом воплощении, инсулин administered через легочную поставку микрочастиц состоя из дикетопиперазина и инсулина fumaryl в своей биологически активно форме. Обязанность на молекуле инсулина замаскирована bonding водопода оно к дикетопиперазину, таким образом позволяя инсулин пройти через мембрану цели. Этот метод поставлять инсулин приводит к в быстро увеличении в концентрации инсулина крови соответствует к увеличению приводящ к от внутривенной поставки.