Disclosed is a method of detecting a nucleic acid sequence of interest in a sample, the method comprising contacting the sample with first and second probes; the first probe comprising a portion complementary to the sequence of interest and so capable of hybridising thereto, and a portion non-complementary to the sequence of interest; the second probe comprising a portion complementary to the sequence of interest and so capable of hybridising thereto, and a portion non-complementary to the sequence of interest but complementary to that portion of the first probe which is non-complementary to the sequence of interest, such that the first and second probes are capable of hybridising to the sequence of interest in an adjacent or substantially adjacent manner, so as to allow complementary portions of the first and second probes to hybridize to each other; causing extension of the first probe with a nucleic acid polymerase, using the second probe as a template; and detecting directly or indirectly the extension of the first probe, so as to indicate the presence of the sequence of interest; characterised in that the first and/or second probe comprises a destabilizing moiety which cannot base pair with the reciprocal probe, thereby preventing hybridisation of the first and second probes in the absence of the sequence of interest.

Révélée est une méthode de détecter un ordre d'acide nucléique d'intérêt pour un échantillon, la méthode comportant entrant en contact avec l'échantillon avec d'abord et en second lieu des sondes ; la première sonde comportant une partie complémentaire à l'ordre d'intérêt et si capable de l'hybridation là-dessus, et une partie non-complementary à l'ordre d'intérêt ; la deuxième sonde comportant une partie complémentaire à l'ordre d'intérêt et si capable de l'hybridation là-dessus, et une partie non-complementary à l'ordre d'intérêt mais complémentaire à cette partie de la première sonde qui est non-complementary à l'ordre d'intérêt, telle que les premières et deuxièmes sondes sont capables de l'hybridation à l'ordre de l'intérêt pour une façon adjacente ou essentiellement adjacente, afin de permettre aux parties complémentaires des premières et deuxièmes sondes d'hybrider entre eux ; entraînant la prolongation de la première sonde avec de la polymérase d'acide nucléique, en utilisant la deuxième sonde comme calibre ; et détectant directement ou indirectement la prolongation de la première sonde, afin d'indiquer la présence de l'ordre d'intérêt ; caractérisé en ce que le premier et/ou en second lieu la sonde comporte une partie de déstabilisation qui ne peut pas baser la paire avec la sonde réciproque, empêchant de ce fait l'hybridation des premières et deuxièmes sondes en l'absence de l'ordre d'intérêt.