Methods of detecting and quantifying genomic nucliec acid molecule sequences are provided using the simultaneous amplification of a plurality of discrete nanoliter-sized samples. A miniaturized closed assembly is also provided for carrying out amplification of a nucleic acid molecule by polymerase chain reaction in multiple nanoliter-sized samples. Methods of filling miniaturized sample chambers are also provided as are methods for determining the number of template molecules in a sample by conducting replicate nucleic acid sequence amplification reactions on a set of terminally diluted samples and counting the number of positive amplification reactions. The methods can be used to detect a single starting nucleic acid target molecule.

I metodi di rilevazione e di misura delle sequenze acide della molecola del nucliec genomic sono forniti usando l'amplificazione simultanea di una pluralità di campioni nanoliter-graduati discreti. Un complessivo chiuso miniaturizzato inoltre è previsto l'amplificazione d'avanzamento di una molecola dell'acido nucleico da reazione a catena della polimerasi in campioni nanoliter-graduati multipli. I metodi di riempire gli alloggiamenti miniaturizzati del campione inoltre sono forniti come sono metodi per la determinazione del numero di molecole della mascherina in un campione conducendo ripiegano le reazioni di amplificazione di sequenza dell'acido nucleico su un insieme dei campioni alla fine diluiti e di conteggio del numero di reazioni positive di amplificazione. I metodi possono essere usati per rilevare una singola molecola cominciante dell'obiettivo dell'acido nucleico.