A method for producing a purified hemoglobin product includes loading a
hemoglobin solution onto an anion exchange chromatography column. At least
one tris(hydroxymethyl) aminomethane acetate buffer solution is injected
into the column. The buffer solution has a pH lower than that of the
column, whereby a purified hemoglobin product elutes from the column. In
one embodiment, the hemoglobin solution initially can be equilibrated at a
pH of greater than about 8.7. In another embodiment, contaminants can be
removed by equilibrating the column with at least about eleven column void
volumes of buffer solution at an intermediate pH of between about 8.2 and
about 8.6, to thereby form a stepped pH gradient. In still another
embodiment, all buffer solutions employed are tris(hydroxymethyl)
aminomethane acetate.
Une méthode pour produire un produit épuré d'hémoglobine inclut charger une solution d'hémoglobine sur une colonne de chromatographie d'échange anionique. Au moins une solution tampon d'acétate d'aminomethane de tris(hydroxymethyl) est injectée en colonne. La solution tampon a un pH inférieur à celui de la colonne, par lequel un produit épuré d'hémoglobine s'élue de la colonne. Dans une incorporation, la solution d'hémoglobine au commencement peut être équilibrée à un pH environ de 8.7 plus grands que. Dans une autre incorporation, des contaminants peuvent être enlevés en équilibrant la colonne avec au moins environ onze volumes vides de colonne de solution tampon à un pH intermédiaire entre environ de 8.2 et environ 8.6, pour former de ce fait un gradient fait un pas de pH. Dans immobile une autre incorporation, toutes les solutions tampon utilisées sont acétate d'aminomethane de tris(hydroxymethyl).