A combination of adenoviral and retroviral vectors used to construct second generation packaging cells that deliver marker genes to target cells is described. A vector based upon Moloney murine leukemia virus (MLV) was used to deliver marker genes, and an adenovirus-based delivery system was used to deliver MLV structural genes (gagpol and env) to cultured cells. The procedure transformed the cells into new retroviral producer cells, which generate replication-incompetent retroviral particles in the culture supernatant for transferring marker genes to target cells. The titer of the retroviral-containing supernatant generated from the second generation producer cells reached above 105 cfu/ml which is comparable to the MLV-based producer cell lines currently used in human gene therapy trials. The vector and procedures are adaptable for experimental human gene therapy in which the new producer cells are transplanted into patients for continuous gene transfer.

Una combinazione dei vettori adenoviral e retroviral usati per costruire le cellule impaccanti della seconda generazione che trasportano i geni dell'indicatore alle cellule dell'obiettivo è descritta. Un vettore basato su Moloney che il virus murino di leucemia (MLV) è stato usato per trasportare i geni dell'indicatore e un sistema adenovirus-basato di consegna è stato usato per trasportare i geni strutturali di MLV (gagpol ed env) alle cellule coltivate. La procedura ha trasformato le cellule nelle nuove cellule retroviral del produttore, che generano le particelle retroviral replica-replication-incompetent nel galleggiante della coltura per i geni di trasferimento dell'indicatore alle cellule dell'obiettivo. Il titolo del galleggiante retroviral-contenente generato dalle cellule del produttore della seconda generazione ha raggiunto superiore a 105 cfu/ml che è paragonabile alle linee MLV-basate delle cellule del produttore attualmente usate nelle prove umane di terapia del gene. Il vettore e le procedure sono adattabili per la terapia umana sperimentale del gene in cui le nuove cellule del produttore sono trapiantate nei pazienti per il trasferimento continuo del gene.