Upon entry into a host cell, retroviruses direct the reverse transcription of the viral RNA genome and the establishment of an integrated proviral DNA. The retroviral integrase protein (IN) is responsible for the insertion of the viral DNA into host chromosomal targets. The IN catalyzes two specific biochemical reactions: (i) cleavage of the 3'termini of the viral DNA to produce 3'-OH ends, and (ii) joining of the two newly generated 3'-termini to the 5'-phosphates on each strand of the target sequence in a concerted strand-transfer reaction. The yeast two-hybrid system was used to identify a novel human gene product, herein designated integrase interactor 1 or INI-1, that binds tightly to the human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) integrase in vitro. Approximately 10.sup.6 complementary DNAs (cDNAs) of the HL60 macrophage-monocytic cell line were expressed as GAL4AC (activation domain) fusions and tested for coactivation of a reporter gene together with a GAL4DB (DNA binding) IN fusion. Overlapping cDNA clones were identified and their nucleotide sequences ascertained. Nucleotide sequence analysis revealed that INI-1 displays limited amino acid homology to the yeast SNF5 protein, a transcriptional activator required for high-level expression of many disparate cellular genes. Nucleotide sequences encoding the INI-1 gene product will prove useful for the generation of biochemical reagents and the development novel HIV-1 antiviral agents.

Op ingang in een gastheercel, retroviruses leid de omgekeerde transcriptie van het virale genoom van RNA en de totstandbrenging van een geïntegreerde proviral DNA. Retroviral integrase eiwit(in) is de oorzaak van de toevoeging van virale DNA in gastheer chromosomale doelstellingen. Katalyseert BINNEN twee specifieke biochemische reacties: (i) splijten van 3'termini van virale DNA om einden 3'-OH, en (ii) het aansluiten bij zich van de twee onlangs geproduceerde 3'-eindpunten aan de 5'-fosfaten op elke bundel van de doelopeenvolging in gezamenlijke een bundel-overdracht reactie te veroorzaken. Het gist twee-hybride systeem werd gebruikt om een nieuw menselijk genproduct, hierin te identificeren aangewezen integraseinteractor 1 of ini-1, die strak aan menselijke hiv-1) integrase immunodeficiency van het virustype 1 (in vitro bindt. Ongeveer werden 10.sup.6 bijkomende DNAs (DNAS) van de HL60 macrophage-monocytic cellijn uitgedrukt als (activeringsdomein) fusies GAL4AC en werden getest voor coactivation van een verslaggeversgen samen met een GAL4DB (de band van DNA) IN fusie. De overlappende klonen DNA werden geïdentificeerd en hun nucleotideopeenvolgingen nagegaan. De de opeenvolgingsanalyse van het nucleotide openbaarde dat vertoningen ini-1 aminozuurhomologie tot de gistsnf5 proteïne beperkten, transcriptional activator die voor uitdrukking op hoog niveau van vele ongelijksoortige cellulaire genen wordt vereist. De opeenvolgingen die van het nucleotide het ini-1 genproduct coderen zullen nuttig voor de generatie van biochemische reagentia en ontwikkelings nieuwe antiviral agenten hiv-1 blijken.