T cells having a desired antigen specificity are stimulated by (a)
introducing immortalizing genes into antigen-presenting cells in a manner
permitting regulation of the expression and/or function of at least one of
these genes to achieve conditionally immortalized antigen-presenting
cells; (b) introducing a gene encoding the desired antigen into the
immortalized cells in a manner permitting the antigen to be expressed
after the expression and/or abolishment of the function of at least one of
the immortalizing genes stops; (c) expanding the immortalized
antigen-presenting cells by expression and/or functional activation of the
immortalizing genes; (d) completing the proliferation of the immortalized
antigen-presenting cells by stopping the expression and/or abolishing the
function of at least one of the controllable immortalizing genes; (e)
continuing the expression of the antigen; (f) adding leucocytic cells
including T cells and cultivating the cell mixture to stimulate the T
cells directed against the desired antigen; and (g) optionally purifying
and isolating the stimulated T cells.
Τα κύτταρα τ που έχουν μια επιθυμητή ιδιομορφία αντιγόνων υποκινούνται με (α) την εισαγωγή των immortalizing γονιδίων στην αντιγόνο-παρουσίαση των κυττάρων με έναν τρόπο που επιτρέπει τον κανονισμό της έκφρασης ή/και η λειτουργία τουλάχιστον ένα από αυτά τα γονίδια για να επιτύχει υπό όρους η αντιγόνο-παρουσίαση των κυττάρων (β) η εισαγωγή ενός γονιδίου που κωδικοποιεί το επιθυμητό αντιγόνο τα κύτταρα με έναν τρόπο που επιτρέπει στο αντιγόνο για να εκφραστεί μετά από την έκφραση ή/και την κατάργηση της λειτουργίας τουλάχιστον μια από τις immortalizing στάσεις γονιδίων (γ) να επεκταθεί η αντιγόνο-παρουσίαση των κυττάρων από την έκφραση ή/και τη λειτουργική ενεργοποίηση των immortalizing γονιδίων (δ) η ολοκλήρωση του πολλαπλασιασμού η αντιγόνο-παρουσίαση των κυττάρων με την παύση της έκφρασης ή/και την κατάργηση της λειτουργίας τουλάχιστον ένα από τα ελέγξιμα immortalizing γονίδια (ε) συνέχιση της έκφρασης του αντιγόνου (F) προσθέτοντας τα λευκοκυτταρικά κύτταρα συμπεριλαμβανομένων των κυττάρων τ και καλλιεργώντας το μίγμα κυττάρων για να υποκινήσει τα κύτταρα τ που κατευθύνονται ενάντια στο επιθυμητό αντιγόνο και (ζ) προαιρετικά καθαρίζοντας και απομονώνοντας τα υποκινημένα κύτταρα τ.
